鸭禽流感病毒抗体检测试剂盒
【主要组成成份】
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序号
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名称
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规格（48T/96T）
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序号
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名称
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规格（48T/96T）（48T/96T）（48T/96T）（48T/96T）（48T/96T）（48T/96T）
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1
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包被板
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12孔×4/8条
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7
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终止液（6号液）
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6ml×1瓶
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2
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酶结合物（1号液）
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3/6ml×1瓶
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8
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阳性对照品
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0.8ml×1支
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3
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浓缩洗涤液（2号液）
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25/50ml×1瓶
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9
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阴性对照品
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0.8ml×1支
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4
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底物（3号液）
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6ml×1瓶
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10
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不干胶膜
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1/2片
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5
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显色剂（4号液）
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6ml×1瓶
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11
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自封袋
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1个
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6
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样本稀释液（5号液）
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25/50ml×1瓶
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12
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说明书
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1份
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【储存条件及有效期】
1. 2~8℃避光保存，防止冷冻，有效期为12个月。
2. 包被板开封后2~8℃避光保存，使用期限为15天。
【适用仪器】
含450nm和630nm波长酶标仪；37℃恒温设备；可调微量移液器。
【样本要求】
1. 为取得*佳实验效果，避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品；
2. 短期（7天）将进行检测的血清样品可存放于2～8℃；如需长期保存，应置于-20℃或以下，避免反复冻融。
【检验方法】
1. 洗涤液配制：用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液（2号液）按1：10稀释（如取50ml浓缩液与450ml蒸馏水或去离子水），充分混匀即为工作洗涤液。
2. 样本稀释：用样本稀释液（5号液）将待检血清按1:100稀释（如5μl血清＋495μl样本稀释液），充分混匀。 阴性、阳性对照品不用稀释，直接加样。
3. 加样反应：每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔（分别加入阴性、阳性对照及样本稀释液100μl）。样本检测孔每孔加已稀释血清样本100μl。37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗涤3次，每次均需停留1分钟；*后一次甩净，拍干。
4. 加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加酶结合物（1号液）1滴，37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，如上洗涤，拍干。
5. 显色反应：加底物（3号液）和显色剂（4号液）各1滴，混匀，37℃下避光显色10分钟。
6. 终止反应： 加终止液（6号液）1滴，以空白对照调零，用酶标仪于450nm波长（630nm作为参比波长）读取OD值。
【参考值】
1. Cut-off 值 (COV)=阴性对照平均OD值×2.1 (阴性对照孔OD值＜0.08时按0.08计)。
2. 有效性判定：
空白对照孔OD值＜0.05（若大于0.05则实验无效）；
阴性对照孔OD值≤0.10（若大于0.10则实验无效）；
阳性对照孔OD值≥0.30（若小于0.30则实验无效）。
【检验结果的解释】
样本OD值≥COV值时，判为禽流感病毒抗体阳性；
样本OD值＜COV值时，判为禽流感病毒抗体阴性。
【检验方法的局限性】本试剂仅适用于检测鸭血清。
【注意事项】
1. 包被板须密封防潮。从冷藏环境中取出时，应平衡至室温后，方可开封启用。未使用完的板条应即时放回有干燥剂的自封袋中，4℃密封保存。
2. 滴加试剂前应将滴瓶轻摇、混匀，首滴弃去；滴加试剂时瓶身应保持竖直。
3. 瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。
4. 孵育时，推荐使用水浴箱。如无水浴箱，可取密封湿盒放入37℃温箱内使用。
5. 用弃的试剂盒及样本都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。
